回答
胡世春
已帮助网友：2400 2018-11-10
琼脂稀释法是将不同剂量的抗菌药物,加入融化并冷至50℃左右的定量MH琼脂中,制成含不同递减浓度抗菌药物的平板,接种受试菌,孵育后观察细菌生长情况,以抑制细菌生长的琼脂平板所含最低药物浓度为MIC,本法优点是可在一个平板上同时作多株菌MIC测定,结果可靠,易发现污染菌；缺点是制备含药琼脂平板费时费力,1.培养基制备使用MH琼脂,按商品说明书进行配制,pH7.2~7.4,淋病奈瑟菌使用GC琼脂基础加1%添加剂；其它链球菌使用含5%（V/V）绵羊血的MH琼脂（当试验磺胺药时,使用溶解的马血）,2.含药琼脂平板制备根据实验设计,将已倍比稀释的不同浓度的抗菌药物分别加入已加热溶解,并在45~50℃水浴中平衡的MH琼脂中,充分混匀倾倒灭菌平皿,琼脂厚度3~4mm,通常按1∶9比例配制药物琼脂平板,根据需要来选择药物浓度范围,配制好的含药琼脂平板应装入密封塑料袋中,置2~8℃冰箱可贮存5天,3.接种物制备与接种制备浓度相当于0.5麦氏标准比浊管的菌悬液,再1∶10稀释,以多点接种器吸取制备好菌液（约1~2μl）接种于琼脂平板表面,每点菌数约为104CFU,形成直径为5~8mm的菌斑,接种好后置35℃孵育16~20h（甲氧西林耐药葡萄球菌、万古霉素耐药肠球菌孵育时间应满24h）,观察结果,奈瑟菌属、链球菌属细菌置5%二氧化碳、幽门螺杆菌置微需氧环境中孵育,4.结果判断将平板置于暗色、无反光物体表面上判断试验终点,以抑制细菌生长的最低药物浓度为MIC,在含甲氧苄胺嘧啶或磺胺琼脂平板上可见轻微细菌生长,与生长对照比较抑制80%以上细菌生长的最低药物浓度作为终点浓度,如果出现有2个以上菌落生长于含药浓度高于终点水平的琼脂平板上,或低浓度药物琼脂平板上不长而高浓度药物琼脂平板上生长现象,则应检查培养物纯度或重复试验,
谢武龙
已帮助网友：3295 2018-11-10
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞,计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞）,再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内,经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数,此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数,故原因是:我们稀释的时候并不知道有没有稀释过度,所以要用不同浓度的稀释液分别做实验,最后取琼脂平板上出现单个的菌落时的浓度进行计数,经过计算,得出菌液体浓度
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